东风夜放花千树 | 九游中心生物泛肿瘤巨噬细胞药物阶段性成果发表

TME诱导的Tri-TRAIL巨噬细胞载体彰显非凡抗肿瘤威力，近期在肿瘤治疗领域取得重大突破。公司科研团队最新研发成果，题为“Tumor micro-environment induced TRAIL secretion from engineered macrophages for anti-tumor therapy”的论文，已在细胞免疫学领域国际期刊《Cellular Immunology》上发表，九游中心生物创始人尹秀山教授担任通讯作者。

TRAIL，全称为肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体，长期以来被视为极具潜力的肿瘤靶向治疗分子。然而，其在临床应用中的局限性一直未能得到妥善解决。为克服这一瓶颈，九游中心生物科研团队创新性地开发了Tri-TRAIL-iM巨噬细胞载体，这是一种能在肿瘤微环境（TME）特定条件下激活，精准释放三聚体TRAIL（Tri-TRAIL）的工程化巨噬细胞。Tri-TRAIL-iM的设计巧妙地利用了巨噬细胞的天然特性，使其成为TME响应式药物递送平台。在体外和动物模型中，Tri-TRAIL-iM展现出对肿瘤细胞的显著细胞毒性，同时对正常细胞影响极小，凸显了其在提高治疗效果和降低副作用方面的优势。

研究人员将小鼠成熟TRAIL与α1(I)胶原的人C肽融合，设计出了Tri-TRAIL-cM。通过Western Blot分析和流式细胞术验证，证实了RAW264.7细胞经慢病毒转导后能高效表达两种形式的TRAIL，其中Tri-TRAIL-cM的分泌水平明显高于Mono-TRAIL-cM。ELISA定量分析进一步确认了Tri-TRAIL-cM在细胞培养上清液中的浓度随时间增加，尤其在24小时后，其浓度显著高于Mono-TRAIL-cM。Annexin V/PI双染色法显示，TRAIL的分泌并未对载体细胞产生毒性。更深层次的表型研究表明，在TME诱导下，分泌TRAIL的巨噬细胞，特别是Tri-TRAIL-cM，能显著下调M2（促癌）表型标志物CD206的表达，同时抑制IL-10和TGFβ的转录活性。这些工程化巨噬细胞在TME中维持了促炎基因的活性，同时高表达Arg1，这与先前研究结果相符，突显了巨噬细胞在肿瘤免疫调控中的关键角色。

在体外细胞研究中，Tri-TRAIL-cM条件培养基对4T1、B16和CT26等肿瘤细胞均展现出不同程度增强的细胞毒活性。这一发现证实了Tri-TRAIL针对肿瘤细胞的高效促凋亡能力，特别是在共培养实验中，其对4T1细胞的凋亡诱导作用更为突出。

进一步地，团队利用Arg1启动子改造得到地Tri-TRAIL-iM，其在正常培养条件下TRAIL分泌水平较低，而在肿瘤调控介质（T-CM）诱导下，TRAIL水平显著升高，展现出对肿瘤微环境（TME）的特异性响应。在TME刺激下，Tri-TRAIL-iM不仅激活了促炎症基因的转录，还避免了非特异性细胞毒性，强化了其抗肿瘤效能。这一创新策略为提高癌症治疗的精准度和减少副作用提供了新途径。

研究人员利用4T1细胞建立了小鼠皮下肿瘤模型，通过免疫染色法评估了Tri-TRAIL-iM在肿瘤和正常组织中的表达情况。实验结果显示，Tri-TRAIL-iM在肿瘤组织中诱导了高水平的TRAIL表达，与Mono-TRAIL-cM组相当。然而，不同于Mono-TRAIL-cM在多个正常器官中亦有TRAIL表达的现象，Tri-TRAIL-iM在非肿瘤组织中未观察到TRAIL的积累，体现了其出色的肿瘤特异性和减少非肿瘤组织副作用的潜力。